??????? 1 適用范圍
??????? 本準(zhǔn)則規(guī)定了殺菌、殺蟲劑使用后可能對作物產(chǎn)生藥害風(fēng)險(xiǎn)的室內(nèi)試驗(yàn)及安全性評價(jià)的基本原則和方法。適用于評價(jià)擬申請登記殺菌、殺蟲劑對作物的直接藥害風(fēng)險(xiǎn),為其登記和合理使用提供科學(xué)依據(jù)。
??????? 2 術(shù)語和定義
??????? 2.1 安全性:殺菌、殺蟲劑在推薦使用劑量范圍內(nèi)及高于推薦劑量一定范圍內(nèi)使用,對處理作物不會造成嚴(yán)重不可逆?zhèn)Γ挥绊懽魑锂a(chǎn)量和品質(zhì)。一般安全性越高,藥害風(fēng)險(xiǎn)越低。
??????? 2.2 藥害:殺菌、殺蟲劑使用后對作物產(chǎn)生的可視性傷害。
??????? 2.3 苗前處理:藥劑種子處理(包衣、拌種、浸種等)和播種前后的苗前土壤處理(撒施、澆灌、注射、熏蒸等)。
??????? 2.4 生長期處理:指在作物出苗以后至收獲之前的藥劑處理。其中在出苗以后至孕穗或花蕾形成之前的藥劑處理,稱為營養(yǎng)生長期處理;在孕穗或花蕾形成后的處理稱為生殖生長期處理。
??????? 2.5 采后處理:指在采收以后對作物的果實(shí)(或種子等)進(jìn)行的藥劑處理。
??????? 3 基本原則與要求
??????? 3.1 試驗(yàn)藥劑
??????? 3.1.1藥劑。試驗(yàn)藥劑采用與擬申請登記藥劑組分或配方一致的樣品,
??????? 即配方及加工工藝相同的制劑。注明通用名、含量和劑型。
??????? 3.1.2劑量設(shè)臵。殺菌、殺蟲劑對作物安全性室內(nèi)試驗(yàn)中,試驗(yàn)藥劑的劑量以生產(chǎn)企業(yè)推薦的田間藥效試驗(yàn)最高劑量為最低試驗(yàn)劑量,按1倍、2倍、4倍劑量的梯度設(shè)計(jì)試驗(yàn)處理劑量,并設(shè)不含藥處理的對照。
??????? 3.2 供試作物
??????? 3.2.1適用靶標(biāo)作物。本準(zhǔn)則主要適用于殺菌、殺蟲劑對糧食作物、瓜菜類作物、經(jīng)濟(jì)作物等作物的室內(nèi)安全性評價(jià),及對果樹類種苗或組培苗的安全性評價(jià)。
??????? 殺菌、殺蟲劑對果樹成株生長期的安全性評價(jià)及其他特殊作物的安全性評價(jià),可以參考本準(zhǔn)則有關(guān)規(guī)定在田間進(jìn)行試驗(yàn)。
??????? 3.2.2供試作物的品種。由于不同品種或生物類型的作物對殺菌、殺蟲劑的敏感性存在很大差異,殺菌、殺蟲劑對作物安全性試驗(yàn),須選用擬申請登記作物的3個(gè)以上不同常規(guī)品種(如:水稻的粳稻、秈稻、糯稻,白皮小麥和紅皮小麥等)作為供試作物。
??????? 3.2.3 供試作物的栽培。用于評價(jià)殺菌、殺蟲劑安全性的每個(gè)作物品種,種質(zhì)或生長勢需要一致。選用干凈飽滿的種子,采用營養(yǎng)一致的土壤在氣候條件可控的培養(yǎng)箱或溫室內(nèi)培養(yǎng),保持良好的水肥管理。
??????? 4 試驗(yàn)方法
??????? 根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)推薦的田間藥效試驗(yàn)施藥時(shí)期和施藥方法選擇。
??????? 4.1 苗前處理
??????? 4.1.1儀器設(shè)備。人工氣候培養(yǎng)箱或光照培養(yǎng)箱或人工氣候室、電子
??????? 天平(精確度到0.1mg)、移液器、培養(yǎng)皿、種子或土壤處理的容器、直徑150~200mm的盆缽等
??????? 4.1.2試材。種子:種質(zhì)一致,去除空癟粒,沖洗干凈并晾干,對照發(fā)芽率應(yīng)在90%以上。
??????? 土壤:試驗(yàn)用土壤經(jīng)風(fēng)干過篩,裝入金屬容器,烘箱中65℃下烘8小時(shí),晾涼后備用。
??????? 4.1.3 藥劑處理。選用種質(zhì)一致的3個(gè)品種的供試作物種子。按照擬申請登記的施藥方法(種子處理或土壤處理)設(shè)計(jì)劑量和進(jìn)行藥劑處理,藥劑處理時(shí)保證均勻一致。其中以浸種方法處理種子的藥劑,應(yīng)該具有水溶性,避免兌水稀釋后沉淀或析出而處理不均勻。
??????? 浸種法:將種子浸泡在藥液中,浸泡時(shí)間與生產(chǎn)常規(guī)一致。處理后撈出直接或經(jīng)清洗后晾干,編號備用。
??????? 拌種和種子包衣法:按推薦方法將藥劑與少量細(xì)土或少量水稀釋后,在適當(dāng)大小的容器內(nèi)按無藥對照和從低劑量至高劑量順序?qū)⒎N子和藥劑攪拌均勻,晾干后編號備用。
??????? 土壤處理:按推薦土壤處理的使用方法和劑量進(jìn)行藥劑土壤處理。如按處理劑量將藥劑與土壤混合制成毒土備用。將無藥的營養(yǎng)土裝盆缽4/5,播種后撒藥土覆蓋10mm,或撒藥土10mm厚后播種,再覆蓋無藥或含藥土壤。
??????? 經(jīng)種子或土壤處理播種后,每天噴水保持土壤濕潤,利于種子發(fā)芽出苗。
??????? 4.1.4藥劑對作物發(fā)芽或出苗的安全性試驗(yàn)方法
??????? 首先通過發(fā)芽試驗(yàn)檢測藥劑對作物種子發(fā)芽的安全性,如檢測結(jié)果為嚴(yán)重抑制發(fā)芽,則不需再做出苗試驗(yàn);如發(fā)芽試驗(yàn)無明顯抑制,則需通過出苗試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證藥劑對作物的安全性。
??????? A:發(fā)芽試驗(yàn):將各藥劑處理的100粒種子,放臵于培養(yǎng)皿內(nèi)保持濕潤的濾紙上,根據(jù)不同作物種子的特性,放臵于適宜條件下培養(yǎng),逐日觀察發(fā)芽情況。記錄并計(jì)算對照發(fā)芽50%、對照完全發(fā)芽及對照完全發(fā)芽3~5天后的各處理發(fā)芽率及根長和根數(shù)。
??????? 種子發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn):
??????? (1)禾谷類作物種子,正常發(fā)育主根長度超過種子長度,幼芽長度超過種子長度1/2。
??????? (2)園粒種子幼根和幼芽長度超過種子直徑。
??????? (3)小粒豆類植物種子有正常幼根,并有一個(gè)幼根與子葉相連。
??????? (4)林木種子的幼根正常,并長于種子長度1/2,小粒種子幼根長度超過種子長度的,均定為發(fā)芽。
??????? B:出苗試驗(yàn):將營養(yǎng)一致的土壤裝于盆缽內(nèi),孔隙度相似,土壤含水量大約60%。將各處理的100粒種子分別播種于盆缽內(nèi)平整的土壤表面,再覆土3~10mm(因種質(zhì)而異),25℃光照培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng),于出苗后7、14、21天定期觀察記錄出苗情況。記載作物的生長狀況和描述藥害癥狀,檢查和計(jì)算不同處理間的出苗率、出苗勢(整齊度以株高標(biāo)準(zhǔn)差表示)、苗高、根長、根數(shù)、鮮重、干重、根莖重量和長度比。
??????? 4.2生長期處理
??????? 4.2.1 儀器設(shè)備。人工氣候培養(yǎng)箱、人工氣候室或可控日光溫室(光照、溫度、濕度),可控定量噴霧設(shè)備,電子天平(精確度0.1mg),移液器等。
??????? 4.2.2試材。生長一致的同一種作物3個(gè)品種。
??????? 4.2.3藥劑處理
??????? 4.2.3.1土壤處理。包括顆粒劑撒施、毒土撒施、澆灌、土壤注射等。按藥劑各處理劑量將顆粒劑均勻撒施,或按劑量將藥劑與225公斤/公頃細(xì)土混合后撒施于作物根圍,或與水稀釋后均勻澆灌或灌注于作物根圍。