各省、自治區(qū)、直轄市及新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)應(yīng)對新冠肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制(領(lǐng)導(dǎo)小組、指揮部):
為指導(dǎo)各地做好新冠病毒混采檢測工作,進(jìn)一步提升新冠病毒核酸檢測能力和效率,落實(shí)“四早”要求,有效滿足疫情常態(tài)化防控需求,我們組織制定了《新冠病毒核酸10合1混采檢測技術(shù)規(guī)范》?,F(xiàn)印發(fā)給你們,供參考使用。
國務(wù)院應(yīng)對新型冠狀病毒肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制醫(yī)療救治組
(代章)
2020年8月17日
(信息公開形式:主動公開)
新冠病毒核酸10合1混采檢測技術(shù)規(guī)范
為落實(shí)國務(wù)院應(yīng)對新冠病毒感染肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制《關(guān)于做好新冠肺炎疫情常態(tài)化防控工作的指導(dǎo)意見》(國發(fā)明電〔2020〕14號)以及《關(guān)于加快推進(jìn)新冠病毒核酸檢測的實(shí)施意見》(聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜發(fā)﹝2020﹞181號)有關(guān)要求,指導(dǎo)各地新冠病毒混采檢測工作,進(jìn)一步提升核酸檢測能力和效率,針對新冠病毒核酸10合1混采檢測(10-in-1 test)技術(shù)(指將采集自10人的10支拭子集合于1個(gè)采集管中進(jìn)行核酸檢測的方法),制定本規(guī)范。
一、樣本采集耗材規(guī)格
(一)病毒采集管。
管帽和管體應(yīng)當(dāng)為聚丙烯材質(zhì),螺旋口可密封,松緊適度。管體透明,可視度好。試管外徑(14.8±0.2)mm×(100.5±0.4)mm, 管帽外徑(15.8±0.15)mm,高度(12.5±0.5)mm。容量企業(yè)定標(biāo)10 ml,內(nèi)含6ml胍鹽或其他有效病毒滅活劑的保存液。保存液應(yīng)當(dāng)帶有易于觀察、辨識的顏色(如粉紅色),并保持一定的流動性,方便取樣。
(二)采集拭子。
宜選用聚酯、尼龍等非棉質(zhì)、非藻酸鈣材質(zhì)的拭子,且柄部為非木質(zhì)材料。折斷點(diǎn)位于距拭子頭頂端3cm左右,易于折斷。
二、采集地點(diǎn)要求
選擇空曠、通風(fēng)良好的場地作為大規(guī)模人群篩查集中采集地點(diǎn)。根據(jù)原有場地條件,劃分為等候區(qū)、采集區(qū)、緩沖區(qū)和臨時(shí)隔離區(qū),有效分散待檢人員密度。應(yīng)當(dāng)設(shè)置急救設(shè)備備用。
(一)等候區(qū)。
設(shè)置人行通道,同時(shí)設(shè)置一米線保證等候人員的防護(hù)安全。根據(jù)天氣條件配備保溫、降溫,遮陽、遮雨等設(shè)施。老年人、兒童、孕婦和其他行動不便者優(yōu)先采集。
(二)采集區(qū)。
根據(jù)氣候條件,配備帳篷、冷/暖風(fēng)扇、適量桌椅,保證醫(yī)護(hù)人員在相對舒適環(huán)境下工作。配備采集用消毒用品、拭子、病毒采集管,并應(yīng)當(dāng)為受檢人員準(zhǔn)備紙巾、嘔吐袋和口罩備用。標(biāo)本如無法及時(shí)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,需準(zhǔn)備4℃冰箱或低溫保存箱暫存。應(yīng)當(dāng)制定防止病原微生物擴(kuò)散和感染的應(yīng)急預(yù)案。
(三)緩沖區(qū)。
空間應(yīng)當(dāng)相對密閉,可供采集人員更換個(gè)人防護(hù)裝備,放置與采樣點(diǎn)規(guī)模相匹配的防護(hù)用品、采集用消毒用品、拭子和采集管,戶外消殺設(shè)備。
(四)臨時(shí)隔離區(qū)。
用于暫時(shí)隔離在采集過程中發(fā)現(xiàn)的疑似患者或高危人群。
三、采集流程
(一)標(biāo)識及信息登記。
1.登記流程。工作人員在采集前分配10個(gè)受檢者為一組,采集前收集并登記受檢者相關(guān)信息(包括姓名、性別、身份證號、聯(lián)系電話、采集地點(diǎn)、采集日期和時(shí)間),按照組別進(jìn)行采集管編號。
2.登記要求。推薦使用身份證讀卡器、二維碼條碼等信息化手段關(guān)聯(lián)受檢者信息,提高信息讀取效率和準(zhǔn)確性。如不具備信息化條件,應(yīng)當(dāng)提前登記《新冠病毒核酸10合1混采檢測登記表》(見附件,以下簡稱混采登記表)。紙質(zhì)登記表隨標(biāo)本送檢前應(yīng)當(dāng)備份存檔于采集點(diǎn)所在社區(qū),便于及時(shí)追溯受檢者。
(二)采集方法。
被采集人員頭部微仰,嘴張大,發(fā)“啊”音,露出兩側(cè)咽扁桃體,采集人員將拭子越過被采集人員舌根,在兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次,然后在咽后壁上下擦拭至少3次。操作完畢后,將拭子頭置入管中、拭子折斷點(diǎn)置于管口處,稍用力折斷使拭子頭落入采集管的液體中,棄去折斷后的拭子桿,旋緊管蓋,將采集管置于穩(wěn)定的置物架上。每例采集后采集人員均應(yīng)進(jìn)行手消毒。
(三)混合拭子。
依照上述采集方法依次采集其余9支拭子,將完成采集的拭子放入同一采集管中,動作輕柔,避免氣溶膠產(chǎn)生。連續(xù)采集10支拭子以后,旋緊管蓋,防止溢灑。如采集管內(nèi)拭子不足10支,應(yīng)做好特殊標(biāo)記并記錄。
四、標(biāo)本送檢
(一)核對信息。
核對采集管標(biāo)簽與混采登記表信息,確保準(zhǔn)確完整,編號一致。
(二)標(biāo)本放置要求。
將核對后的采集管放入透明塑料密封袋(一層容器)中并封嚴(yán)袋口,用75%乙醇噴灑密封袋外部。將密封袋放入二層容器(可選內(nèi)配適量吸濕材料的包裝盒或雙層醫(yī)用垃圾袋),密封后用75%乙醇噴灑消毒。將二層容器放入具有“生物危害”標(biāo)識的專用標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)箱(推薦使用符合《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》A類物品運(yùn)輸U(kuò)N2814標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)運(yùn)箱),二層容器和轉(zhuǎn)運(yùn)箱之間應(yīng)當(dāng)放置降溫凝膠冰袋。二層容器應(yīng)當(dāng)固定在轉(zhuǎn)運(yùn)箱中,保持標(biāo)本直立。密封轉(zhuǎn)運(yùn)箱后,使用75%乙醇噴灑消毒,轉(zhuǎn)運(yùn)箱表面潔凈無污染。
(三)標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)要求。
標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)運(yùn)箱應(yīng)當(dāng)由專門標(biāo)本運(yùn)送人員負(fù)責(zé)運(yùn)送。標(biāo)本應(yīng)當(dāng)在采集后2—4小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。混采登記表放入獨(dú)立密封袋,隨轉(zhuǎn)運(yùn)箱一同轉(zhuǎn)運(yùn)。不能立即送檢的,應(yīng)當(dāng)配備專門的冰箱或冷藏箱保存,并做好標(biāo)本接收、保存登記。標(biāo)本采集后24小時(shí)內(nèi)可置于4℃保存。
五、實(shí)驗(yàn)室接收
(一)標(biāo)本簽收。
運(yùn)送和接收人員應(yīng)當(dāng)對標(biāo)本進(jìn)行雙簽收。接收人員檢查混采登記表是否填寫完整,被檢者信息是否可追溯,轉(zhuǎn)運(yùn)箱、二層容器有無破損。
(二)標(biāo)本打開。
應(yīng)當(dāng)在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)打開轉(zhuǎn)運(yùn)箱,取出二層容器。在生物安全柜中打開二層容器,用75%乙醇噴灑或擦拭消毒后,取出密封袋,用75%乙醇試劑噴灑或擦拭消毒,并檢查是否密封完好。
(三)標(biāo)本檢查。
核對采集管標(biāo)簽與混采登記表信息是否一致。取出采集管,檢查管壁是否有破損、管口滲漏等,確認(rèn)無破損、滲漏后用75%乙醇噴灑或擦拭消毒。如有破損、滲漏,應(yīng)當(dāng)立即停止操作,用吸水紙覆蓋后使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理,做好不合格登記后銷毀。
(四)標(biāo)本保存。
不能及時(shí)檢測的標(biāo)本放入專用冰箱保存。24小時(shí)內(nèi)檢測的標(biāo)本可置于4℃保存。24小時(shí)內(nèi)無法檢測的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)置于-70℃或以下溫度保存。如無-70℃保存條件,則于-20℃暫存。避免標(biāo)本反復(fù)凍融。設(shè)立專庫或?qū)9癖4鏄?biāo)本,雙人雙鎖管理。
(五)轉(zhuǎn)運(yùn)容器移出。
使用后的二層容器內(nèi)外壁經(jīng)75%乙醇擦拭消毒后移出生物安全柜,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后使用紫外燈照射消毒。
六、標(biāo)本檢測與質(zhì)量控制
(一)標(biāo)本檢測。
實(shí)驗(yàn)室接收標(biāo)本后,應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行檢測。檢測前進(jìn)行充分震蕩洗脫,之后進(jìn)行核酸提取及擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。推薦選用包含針對新冠病毒開放讀碼框1ab(open reading frame 1ab,ORF1ab)和核殼蛋白(nucleocapsid protein,N)基因區(qū)域的試劑。若使用核酸提取儀,核酸提取試劑應(yīng)與核酸提取儀配套使用。擴(kuò)增試劑盒應(yīng)當(dāng)選用國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)帶有注冊文號的試劑盒。建議選擇檢測限低、靈敏度高的檢測試劑盒。
(二)檢測質(zhì)控。
每批檢測至少有1份弱陽性質(zhì)控品(第三方質(zhì)控品,通常為檢出限的3倍左右)、2份陰性質(zhì)控品(試劑盒自帶陰性質(zhì)控品)和1份空白對照品(生理鹽水或焦碳酸二乙酯處理水)??瞻讓φ掌窇?yīng)當(dāng)開蓋放置在提取儀或操作臺面上過夜,用于環(huán)境污染評估。質(zhì)控品隨機(jī)放在臨床標(biāo)本中,參與從提取到擴(kuò)增的全過程。
(三)質(zhì)控結(jié)果。
弱陽性質(zhì)控品測定為陽性,陰性質(zhì)控品全部測定為陰性,視為在控。反之,則為失控,不可出具檢測報(bào)告,應(yīng)立即分析原因,必要時(shí)重新檢測標(biāo)本。
七、檢驗(yàn)結(jié)果處理
新冠病毒核酸定性檢測報(bào)告應(yīng)當(dāng)包括檢測結(jié)果(檢出/陽性、未檢出/陰性)、方法學(xué)、檢出限等。
(一)結(jié)果判斷。
依據(jù)所用擴(kuò)增試劑說明書,判斷檢測結(jié)果為未檢出/陰性或者檢出/陽性。若結(jié)果處于灰區(qū),建議作為混采陽性結(jié)果進(jìn)行復(fù)核。
(二)陽性結(jié)果復(fù)核。
1.混采檢測結(jié)果為陽性、灰區(qū)或單個(gè)靶標(biāo)陽性,通知相關(guān)部門對該混采管的10個(gè)受試者暫時(shí)單獨(dú)隔離,并重新采集單管拭子進(jìn)行復(fù)核。
2.復(fù)核單管核酸檢測如均為陰性,則按照陰性結(jié)果回報(bào)。暫時(shí)隔離人員即解除隔離;如檢測結(jié)果陽性,按程序上報(bào)。
八、檢測后樣本處理
檢測后的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡快就地銷毀,做好高壓滅菌質(zhì)量監(jiān)控和消毒、銷毀記錄。
九、技術(shù)人員基本要求
采樣人員和檢測人員要求應(yīng)滿足《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊(試行)》要求。
十、生物安全防護(hù)
(一)標(biāo)本采集和運(yùn)送人員。
對于采集低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域人群的采集者,采用二級生物安全防護(hù)。包括:一次性帽子、醫(yī)用防護(hù)口罩(N95)、手套(必要時(shí)雙層)、護(hù)目鏡/面屏、隔離衣,鞋套(必要時(shí))。標(biāo)本運(yùn)送人員采用一級生物安全防護(hù),包括:醫(yī)用外科口罩、乳膠手套、工作服,可戴醫(yī)用防護(hù)帽。
(二)標(biāo)本接收和檢測人員。
標(biāo)本接收人員應(yīng)當(dāng)為核酸檢測實(shí)驗(yàn)室經(jīng)生物安全防護(hù)培訓(xùn)的指定人員,采用二級以上生物安全防護(hù)。生物安全防護(hù)標(biāo)準(zhǔn)可根據(jù)所從事工作的危險(xiǎn)性進(jìn)行區(qū)分。進(jìn)行試劑準(zhǔn)備和核酸擴(kuò)增的工作人員采用二級防護(hù)。處理標(biāo)本的人員必須嚴(yán)格遵照三級防護(hù)標(biāo)準(zhǔn),包括:醫(yī)用防護(hù)口罩或N95、單或雙層乳膠手套(條件許可,可以不同顏色)、面屏、護(hù)目鏡、工作服外防護(hù)服、單或雙層醫(yī)用防護(hù)帽,手衛(wèi)生。必要時(shí)雙層口罩(外醫(yī)用防護(hù)口罩,內(nèi)N95)。
?
附件:新冠病毒核酸10合1混采檢測登記表
附件
新冠病毒核酸10合1混采檢測登記表
采集地點(diǎn): ?????????????? ????????? 采集日期:
送樣人: ???????????????????? ???? ?送樣人聯(lián)系電話:
送檢時(shí)間: ????????? ?接收人: ??? ???????接收時(shí)間:
采集管編號 | 序號 | 姓名 | 性別 | 年齡 | 身份證號 | 聯(lián)系電話 | 采集時(shí)間 | 是否去過高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū) | 是否發(fā)熱 | 實(shí)驗(yàn)室編號 | 檢測結(jié)果 |
? | 1 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? |
2 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
3 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
4 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
5 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
6 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
7 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
8 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
9 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | |||
10 | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? | ? |
注:送檢時(shí)間,接收時(shí)間格式為XX月XX日XX時(shí),采集時(shí)間格式為XX時(shí);檢測結(jié)果如為ORF1ab或N基因單獨(dú)陽性,需詳細(xì)列出。