摘要：簡(jiǎn)述了生物傳感器的基本概念和原理、尤其是微生物傳感器近年來(lái)在發(fā)酵工業(yè)及環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域中的研究與應(yīng)用。并且介紹了生物傳感芯片。生物電極是以固定化生物體組成作為分子識(shí)別元件的敏感材料，與氧電極、膜電極和燃料電極等構(gòu)成生物傳感器， 發(fā)酵工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品監(jiān)測(cè)、醫(yī)學(xué)等方面得到廣泛的應(yīng)用。生物傳感器專一性好、易操作、設(shè)備簡(jiǎn)單、測(cè)量快速準(zhǔn)確、適用范圍廣。隨著固定化技術(shù)的發(fā)展，生物傳感器在市場(chǎng)上具有極強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)力。

關(guān)鍵詞： 基本概念、發(fā)展特點(diǎn)、生物傳感器、生物傳感器芯片、發(fā)酵工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)。

生物傳感器芯片

德國(guó)億恒科技與德國(guó)馬克斯·普朗克生化研究所合作，直接將被稱為“神經(jīng)芯片”的最新開(kāi)發(fā)的生物傳感器芯片與活性神經(jīng)細(xì)胞相接觸，成功地讀取到了細(xì)胞產(chǎn)生的電信號(hào)。據(jù)稱，“神經(jīng)芯片”記錄了由蝸牛大腦中提取的神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生的電信號(hào)。由于神經(jīng)細(xì)胞之間通過(guò)電脈沖進(jìn)行信息交流，因此通過(guò)讀取和記錄這些信息，有望為神經(jīng)學(xué)流程帶來(lái)新的思路?！吧窠?jīng)芯片”的尺寸為5毫米×6毫米，在1平方毫米的面積中集成了128×128個(gè)傳感器。在各傳感器的下面嵌入處理電路，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生的微弱信號(hào)進(jìn)行放大和處理。每個(gè)神經(jīng)細(xì)胞均被浸入到傳感器陣列上的培養(yǎng)液中，因此能夠使神經(jīng)細(xì)胞保持活性狀態(tài)，并能重新構(gòu)筑神經(jīng)組織。由此一來(lái)，可以在數(shù)周時(shí)間內(nèi)在不破壞神經(jīng)組織的情況下觀察神經(jīng)組織，能夠連續(xù)地觀察神經(jīng)系統(tǒng)和大腦是如何學(xué)習(xí)、處理和記憶的。大家對(duì)生物傳感器芯片產(chǎn)生興趣了嗎？那我為大家簡(jiǎn)單介紹介紹!

1. 生物傳感器的基本概念：

生物傳感器是用生物活性材料（酶、蛋白質(zhì)、DNA、抗體、抗原、生物膜等）與物理化學(xué)換能器有機(jī)結(jié)合的一門交叉學(xué)科，是發(fā)展生物技術(shù)必不可少的一種先進(jìn)的檢測(cè)方法與監(jiān)控方法，也是物質(zhì)分子水平的快速、微量分析方法。在未來(lái)21世紀(jì)知識(shí)經(jīng)濟(jì)發(fā)展中，生物傳感器技術(shù)必將是介于信息和生物技術(shù)之間的新增長(zhǎng)點(diǎn)，在國(guó)民經(jīng)濟(jì)中的臨床診斷、工業(yè)控制、食品和藥物分析（包括生物藥物研究開(kāi)發(fā)）、環(huán)境保護(hù)以及生物技術(shù)、生物芯片等研究中有著廣泛的應(yīng)用前景。各種生物傳感器有以下共同的結(jié)構(gòu)：包括一種或數(shù)種相關(guān)生物活性材料（生物膜）及能把生物活性表達(dá)的信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)的物理或化學(xué)換能器（傳感器），二者組合在一起，用現(xiàn)代微電子和自動(dòng)化儀表技術(shù)進(jìn)行生物信號(hào)的再加工，構(gòu)成各種可以使用的生物傳感器分析裝置、儀器和系統(tǒng)。[1]

2. 生物傳感器的原理:

待測(cè)物質(zhì)經(jīng)擴(kuò)散作用進(jìn)入生物活性材料，經(jīng)分子識(shí)別，發(fā)生生物學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生的信息繼而被相應(yīng)的物理或化學(xué)換能器轉(zhuǎn)變成可定量和可處理的電信號(hào)，再經(jīng)二次儀表放大并輸出，便可知道待測(cè)物濃度[2]。

3. ?未來(lái)生物傳感器幾大特點(diǎn)

近年來(lái)，隨著生物科學(xué)、信息科學(xué)和材料科學(xué)發(fā)展的推動(dòng)，生物傳感器技術(shù)飛速發(fā)展?？梢灶A(yù)見(jiàn)，未來(lái)的生物傳感器將具有以下特點(diǎn)。

功能多樣化：未來(lái)的生物傳感器將進(jìn)一步涉及醫(yī)療保健、疾病診斷、食品檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、發(fā)酵工業(yè)的各個(gè)領(lǐng)域。目前,?生物傳感器研究中的重要內(nèi)容之一就是研究能代替生物視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)和觸覺(jué)等感覺(jué)器官的生物傳感器,即仿生傳感器。

微型化：隨著微加工技術(shù)和納米技術(shù)的進(jìn)步，生物傳感器將不斷地微型化，各種便攜式生物傳感器的出現(xiàn)使人們?cè)诩抑羞M(jìn)行疾病診斷，在市場(chǎng)上直接檢測(cè)食品成為可能。

智能化與集成化：未來(lái)的生物傳感器必定與計(jì)算機(jī)緊密結(jié)合，自動(dòng)采集數(shù)據(jù)、處理數(shù)據(jù)，更科學(xué)、更準(zhǔn)確地提供結(jié)果，實(shí)現(xiàn)采樣、進(jìn)樣、結(jié)果一條龍,形成檢測(cè)的自動(dòng)化系統(tǒng)。同時(shí),??芯片技術(shù)將越來(lái)越多地進(jìn)入傳感器領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)檢測(cè)系統(tǒng)的集成化、一體化。

低成本、高靈敏度、高穩(wěn)定性和高壽命:生物傳感器技術(shù)的不斷進(jìn)步,必然要求不斷降低產(chǎn)品成本，提高靈敏度、穩(wěn)定性和延長(zhǎng)壽命。這些特性的改善也會(huì)加速生物傳感器場(chǎng)化、商品化的進(jìn)程[3]。

4. ?研究現(xiàn)狀及主要應(yīng)用領(lǐng)域

Clark和Lyons在1962年最先提出生物傳感器。生物傳感器在發(fā)酵工藝、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品工程、臨床醫(yī)學(xué)、軍事及軍事醫(yī)學(xué)等方面得到了深度重視和廣泛應(yīng)用。在最初15年里，生物傳感器主要是以研制酶電極制作的生物傳感器為主，但是由于酶的價(jià)格昂貴并不夠穩(wěn)定，因此以酶作為敏感材料的傳感器，其應(yīng)用受到一定的限制。

近些年來(lái)，微生物固定化技術(shù)的不斷發(fā)展，產(chǎn)生了微生物電極。微生物電極以微生物活體作為分子識(shí)別元件，與酶電極相比有其獨(dú)到之處。它可以克服價(jià)格昂貴、提取困難及不穩(wěn)定等弱點(diǎn)。此外，還可以同時(shí)利用微生物體內(nèi)的輔酶處理復(fù)雜反應(yīng)。而目前，光纖生物傳感器的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。而且隨著聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR)的發(fā)展，應(yīng)用PCR的DNA生物傳感器也越來(lái)越多。

4.1? 食品工業(yè)

生物傳感器可以用來(lái)檢測(cè)食品中營(yíng)養(yǎng)成分和有害成分的含量、食品的新鮮程度等。如已經(jīng)開(kāi)發(fā)出來(lái)的酶電極型生物傳感器可用來(lái)分析白酒、蘋果汁、果醬和蜂蜜中的葡萄糖含量，從而衡量水果的成熟度。采用亞硫酸鹽氧化酶為敏感材料制成的電流型二氧化硫酶電極可用于測(cè)定食品中的亞硫酸含量。此外，也有用生物傳感器測(cè)定色素和乳化劑的應(yīng)用。[4]

4.2??? 醫(yī)學(xué)領(lǐng)域

生物傳感器在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也發(fā)揮著越來(lái)越大的作用：臨床上用免疫傳感器等生物傳感器來(lái)檢測(cè)體液中的各種化學(xué)成分，為醫(yī)生的診斷提供依據(jù)；在軍事醫(yī)學(xué)中，對(duì)生物毒素的及時(shí)快速檢測(cè)是防御生物武器的有效措施。生物傳感器已應(yīng)用于監(jiān)測(cè)多種細(xì)菌、病毒及其毒素。生物傳感器還可以用來(lái)測(cè)量乙酸、乳酸、乳糖、尿酸、尿素、抗生素、谷氨酸等各種氨基酸，以及各種致癌和致變物質(zhì)。[5]一種能在人體內(nèi)自由穿梭的新型納米生物傳感器專用材料，近日由華東理工大學(xué)和上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院科研人員聯(lián)合研制成功，為腫瘤普查提供了更為先進(jìn)的手段。目前，這項(xiàng)成果已申請(qǐng)了國(guó)家專利。該項(xiàng)目負(fù)責(zé)人、華東理工大學(xué)分析測(cè)試中心主任藍(lán)閩波教授介紹，這是一種由有機(jī)化合物制成的納米級(jí)材料，直徑僅為一米的十億分之一，可以像藥水一樣順著注射器“流”入人體血管，充當(dāng)傳感器的“神經(jīng)”。遙控這些“神經(jīng)”的新型生物傳感器，是生物體內(nèi)的氧信號(hào)。通常，正常組織中的氧濃度約為1%至2%，長(zhǎng)了腫塊的部位比2%略高，而如果是惡性腫瘤，這一數(shù)字則要接近3%?！敖柚@種微小差別，傳感器就能輕而易舉地進(jìn)行腫瘤普查。[6]

4.3?? 生物傳感器在發(fā)酵工業(yè)中的運(yùn)用

各種生物傳感器中，微生物傳感器最適合發(fā)酵工業(yè)的測(cè)定。因?yàn)榘l(fā)酵過(guò)程中常存在對(duì)酶的干擾物質(zhì)，并且發(fā)酵液往往不是清澈透明的，不適用于光譜等方法測(cè)定。而應(yīng)用微生物傳感器則極有可能消除干擾，并且不受發(fā)酵液混濁程度的限制。同時(shí)，由于發(fā)酵工業(yè)是大規(guī)模的生產(chǎn)，微生物傳感器其成本低設(shè)備簡(jiǎn)單的特點(diǎn)使其具有極大的優(yōu)勢(shì)。

（1）原材料及代謝產(chǎn)物的測(cè)定

微生物傳感器可用于原材料如糖蜜、乙酸等的測(cè)定，代謝產(chǎn)物如頭孢霉素、谷氨酸、甲酸、甲烷、醇類、青霉素、乳酸等的測(cè)定。測(cè)量的原理基本上都是用適合的微生物電極與氧電極組成，利用微生物的同化作用耗氧，通過(guò)測(cè)量氧電極電流的變化量來(lái)測(cè)量氧氣的減少量，從而達(dá)到測(cè)量底物濃度的目的。[7]

在各種原材料中葡萄糖的測(cè)定對(duì)過(guò)程控制尤其重要，用熒光假單細(xì)胞代謝消耗葡萄糖的作用，通過(guò)氧電極進(jìn)行檢測(cè)，可以估計(jì)葡萄糖的濃度。這種微生物電極和葡萄糖酶電極型相比，測(cè)定結(jié)果是類似的，而微生物電極靈敏度高，重復(fù)實(shí)用性好，而且不必使用昂貴的葡萄糖酶。[7]

當(dāng)乙酸用作碳源進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)，乙酸含量高于某一濃度會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)，因此需要在線測(cè)定。用固定化酵母，透氣膜和氧電極組成的微生物傳感器可以測(cè)定乙酸的濃度。[7]

此外，還有用大腸桿菌組合二氧化碳?xì)饷綦姌O，可以構(gòu)成測(cè)定谷氨酸的微生物傳感器，將檸檬酸桿菌完整細(xì)胞固定化在膠原蛋白膜內(nèi)，由細(xì)菌―膠原蛋白膜反應(yīng)器和組合式玻璃電極構(gòu)成的微生物傳感器可應(yīng)用于發(fā)酵液中頭孢酶素的測(cè)定等等。[7]

(2)?微生物細(xì)胞總數(shù)的測(cè)定

在發(fā)酵控制方面，一直需要直接測(cè)定細(xì)胞數(shù)目的簡(jiǎn)單而連續(xù)的方法。人們發(fā)現(xiàn)在陽(yáng)極表面，細(xì)菌可以直接被氧化并產(chǎn)生電流。這種電化學(xué)系統(tǒng)已應(yīng)用于細(xì)胞數(shù)目的測(cè)定，其結(jié)果與傳統(tǒng)的菌斑計(jì)數(shù)法測(cè)細(xì)胞數(shù)是相同的[8]。

(3)? 代謝試驗(yàn)的鑒定

傳統(tǒng)的微生物代謝類型的鑒定都是根據(jù)微生物在某種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況進(jìn)行的。這些實(shí)驗(yàn)方法需要較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間和專門的技術(shù)。微生物對(duì)底物的同化作用可以通過(guò)其呼吸活性進(jìn)行測(cè)定。用氧電極可以直接測(cè)量微生物的呼吸活性。因此，可以用微生物傳感器來(lái)測(cè)定微生物的代謝特征。這個(gè)系統(tǒng)已用于微生物的簡(jiǎn)單鑒定、微生物培養(yǎng)基的選擇、微生物酶活性的測(cè)定、廢水中可被生物降解的物質(zhì)估計(jì)、用于廢水處理的微生物選擇、活性污泥的同化作用試驗(yàn)、生物降解物的確定、微生物的保存方法選擇等[9]。

4.4??? 環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域 (1).?生化需氧量的測(cè)定 ??? 生化需氧量的測(cè)定是監(jiān)測(cè)水體被有機(jī)物污染狀況的最常用指標(biāo)。常規(guī)的BOD測(cè)定需要5天的培養(yǎng)期，操作復(fù)雜、重復(fù)性差、耗時(shí)耗力、干擾性大，不宜現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)，所以迫切需要一種操作簡(jiǎn)單、快速準(zhǔn)確、自動(dòng)化程度高、適用廣的新方法來(lái)測(cè)定。目前，有研究人員分離了兩種新的酵母菌種SPT1和SPT2，并將其固定在玻璃碳極上以構(gòu)成微生物傳感器用于測(cè)量BOD，其重復(fù)性在±10%以內(nèi)。將該傳感器用于測(cè)量紙漿廠污水中BOD的測(cè)定，其測(cè)量最小值可達(dá)2mg/l，所用時(shí)間為5min。還有一種新的微生物傳感器，用耐高滲透壓的酵母菌種作為敏感材料，在高滲透壓下可以正常工作。并且其菌株可長(zhǎng)期干燥保存，浸泡后即恢復(fù)活性，為海水中BOD的測(cè)定提供了快捷簡(jiǎn)便的方法。

除了微生物傳感器，還有一種光纖生物傳感器已經(jīng)研制出來(lái)用于測(cè)定河水中較低的BOD值。該傳感器的反應(yīng)時(shí)間是15min，最適工作條件為30°C，pH=7。這個(gè)傳感器系統(tǒng)幾乎不受氯離子的影響(在1000mg/l范圍內(nèi))，并且不被重金屬(Fe3+、Cu2+、Mn2+、Cr3+、Zn2+)所影響。該傳感器已經(jīng)應(yīng)用于河水BOD的測(cè)定，并且獲得了較好的結(jié)果[10]。

現(xiàn)在有一種將BOD生物傳感器經(jīng)過(guò)光處理(即以TiO2作為半導(dǎo)體，用6W燈照射約4min)后，靈敏度大大提高，很適用于河水中較低BOD的測(cè)量[10]。。同時(shí)，一種緊湊的光學(xué)生物傳感器已經(jīng)發(fā)展出來(lái)用于同時(shí)測(cè)量多重樣品的BOD值。它使用三對(duì)發(fā)光二極管和硅光電二極管，假單胞細(xì)菌(Pseudomonas?fluorescens)用光致交聯(lián)的樹(shù)脂固定在反應(yīng)器的底層，該測(cè)量方法既迅速又簡(jiǎn)便，在4℃下可使用六周，已經(jīng)用于工廠廢水處理的過(guò)程中[10]。

(2) 各種污染物的測(cè)定

常用的重要污染指標(biāo)有氨、亞硝酸鹽、硫化物、磷酸鹽、致癌物質(zhì)與致變物質(zhì)、重金屬離子、酚類化合物、表面活性劑等物質(zhì)的濃度。目前已經(jīng)研制出了多種測(cè)量各類污染物的生物傳感器并已投入實(shí)際應(yīng)用中了。

測(cè)量氨和硝酸鹽的微生物傳感器，多是用從廢水處理裝置中分離出來(lái)的硝化細(xì)菌和氧電極組合構(gòu)成。目前有一種微生物傳感器可以在黑暗和有光的條件下測(cè)量硝酸鹽和亞硝酸鹽(NOx-)，它在鹽環(huán)境下的測(cè)量使得它可以不受其他種類的氮的氧化物的影響。用它對(duì)河口的NOx-進(jìn)行了測(cè)量，其效果較好[11]。

硫化物的測(cè)定是用從硫鐵礦附近酸性土壤中分離篩選得到的專性、自養(yǎng)、好氧性氧化硫硫桿菌制成的微生物傳感器。在pH=2.5、31℃時(shí)一周測(cè)量200余次，活性保持不變，兩周 后活性降低20%。傳感器壽命為7天，其設(shè)備簡(jiǎn)單，成本低，操作方便。目前還有用一種光微生物電極測(cè)硫化物含量，所用細(xì)菌是Chromatium. sp. 與氫電極連接構(gòu)成[12]。

最近科學(xué)家們?cè)谖廴緟^(qū)分離出一種能夠發(fā)熒光的細(xì)菌，此種細(xì)菌含有熒光基因，在污染源的刺激下能夠產(chǎn)生熒光蛋白，從而發(fā)出熒光?？梢酝ㄟ^(guò)遺傳工程的方法將這種基因?qū)牒线m的細(xì)菌內(nèi)，制成微生物傳感器，用于環(huán)境監(jiān)測(cè)?，F(xiàn)在已經(jīng)將熒光素酶導(dǎo)入大腸桿菌中，用來(lái)檢測(cè)砷的有毒化合物[13]。

水體中酚類和表面活性劑的濃度測(cè)定已經(jīng)有了很大的發(fā)展。目前，有9種革蘭氏陰性細(xì)菌從西伯利亞石油盆地的土壤中分離出來(lái)，以酚作為唯一的碳源和能源。這些菌種可以提高生物傳感器的感受器部分的靈敏度。它對(duì)酚的監(jiān)測(cè)極限為1′10-9mol。該傳感器工作的最適條件為：pH=7.4, 35℃，連續(xù)工作時(shí)間為30h[14]。還有一種假單胞菌屬)制成的測(cè)量表面活性劑濃度的電流型生物傳感器，將微生物細(xì)胞固定在凝膠(瓊脂、瓊脂糖和海藻酸鈣鹽)和聚乙醇膜上，可以用層析試紙GF/A，或者是谷氨酸醛引起的微生物細(xì)胞在凝膠中的交聯(lián)，長(zhǎng)距離的保持它們?cè)诟邼舛缺砻婊钚詣z測(cè)中的活性和生長(zhǎng)力。該傳感器能在測(cè)量結(jié)束后很快的恢復(fù)敏感元件的活性[14]。

除此之外，污水中重金屬離子濃度的測(cè)定也是不容忽視的。目前已經(jīng)成功設(shè)計(jì)了一個(gè)完整的，基于固定化微生物和生物體發(fā)光測(cè)量技術(shù)上的重金屬離子生物有效性測(cè)定的監(jiān)測(cè)和分析系統(tǒng)。將弧菌屬細(xì)菌體內(nèi)的一個(gè)操縱子在一個(gè)銅誘導(dǎo)啟動(dòng)子的控制下導(dǎo)入產(chǎn)堿桿菌屬細(xì)菌中，細(xì)菌在銅離子的誘導(dǎo)下發(fā)光，發(fā)光程度與離子濃度成正比。將微生物和光纖一起包埋在聚合物基質(zhì)中，可以獲得靈敏度高、選擇性好、測(cè)量范圍廣、儲(chǔ)藏穩(wěn)定性強(qiáng)的生物傳感器。目前，這種微生物傳感器可以達(dá)到最低測(cè)量濃度1′10-9mol[15]。

5. 總結(jié)

本文介紹了生物傳感器的概念、原理和未來(lái)發(fā)展的特點(diǎn)。而后借用了別人的研究成果尤其是國(guó)外的關(guān)于生物傳感器的最新的技術(shù)像大家粗略的介紹了很多種最新的生物傳感器，著重介紹了在發(fā)酵工業(yè)和環(huán)境檢測(cè)中許多生物傳感器的最新的技術(shù)和應(yīng)用。生物傳感器未來(lái)發(fā)展的前景很廣闊，是很有發(fā)展?jié)摿Φ男袠I(yè)。今后的應(yīng)用會(huì)非常的廣泛。智能化的生物傳感器可以代替很多以往很復(fù)雜的監(jiān)測(cè)過(guò)程，讓我們更加省力的監(jiān)測(cè)環(huán)境。不止這些，很多行業(yè)中如發(fā)酵、食品中都會(huì)有廣闊的運(yùn)用前景。在醫(yī)藥學(xué)中腫瘤的偵察可以通過(guò)傳感器來(lái)實(shí)現(xiàn)是目前的新技術(shù)，上文已有介紹，在此就不贅述了。

對(duì)于生物傳感器的發(fā)展前景我表示非常的樂(lè)觀，將來(lái)會(huì)通過(guò)很多科學(xué)家的不斷努力與創(chuàng)新，生物傳感器的用途會(huì)進(jìn)一步被發(fā)展，應(yīng)用的范圍也會(huì)更加的廣泛。我們都將從中獲益。我所介紹的最新傳感器技術(shù)的書籍，有興趣的同學(xué)可以翻閱。本人只是羅列了最新技術(shù)在發(fā)表的書籍，所以以上這篇文章也只是向大家介紹了很多種生物傳感器。由于本人并無(wú)實(shí)驗(yàn)條件所以論文也只能像大家介紹些最新的技術(shù)請(qǐng)見(jiàn)諒。此文章參照了一些文章，是通過(guò)網(wǎng)絡(luò)這個(gè)無(wú)邊的海洋所以作者不祥只寫出了網(wǎng)站。特表示感謝和歉意。

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